基于化学计量学的川木香抗炎活性谱效关系研究

马玉玲; 薛志远; 高霞; 张培; 孙伯禄; 郑晓萍; 胡芳弟

doi:10.16495/j.1006-3757.2016.01.003

基于化学计量学的川木香抗炎活性谱效关系研究

doi: 10.16495/j.1006-3757.2016.01.003

兰州大学药学院, 甘肃兰州 730000

基金项目:

甘肃省中医药管理局科研课题 GZK-2013-13

兰州市科技计划项目 2013-4-75

兰州市科技计划项目 214-2-30

详细信息

作者简介:
马玉玲(1990-), 女, 硕士在读, 主要从事中药活性成分分离分析的研究, E-mail:mayl2014@lzu.edu.cn

通讯作者:
胡芳弟(1971-), 女, 博士, 教授, 硕士生导师, 主要从事中药成分分离分析及中药新药研究, Tel:13919780068, Email:hufd@lzu.edu.cn

中图分类号: O657.33
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出版历程
- 收稿日期: 2015-11-12
- 修回日期: 2015-12-23
- 刊出日期: 2016-03-01

Spectrum-Effect Relationship Between Vladimiriae Radix and Anti-Inflammatory Activity Based on Chemometric Methods

College of Pharmacy, Lanzhou University, Lanzhou 730000, China

摘要

摘要: 研究川木香抗炎活性与其HPLC指纹图谱的谱效关系, 探究其抗炎活性成分.采用HPLC-DAD法获取12个川木香样本水提物的指纹图谱, 小鼠耳廓肿胀试验检测川木香的抗炎活性.运用偏最小二乘法进行谱效相关性分析, 以标准品比对及HPLC-MS/MS法对抗炎活性贡献较大的色谱峰进行鉴定.从川木香指纹图谱中共确定了17个共有峰, 川木香水提物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有一定的抑制作用.谱效关联研究结果显示有10个共有峰与抗炎活性呈正相关, 依次为P8 >P4 >P3 >P10 >P14 >P15 >P7 >P5 >P9 >P16, 其中色谱峰P3、P4、P8、P10分别鉴定为紫丁香苷、绿原酸、咖啡酸和1, 3-O-二咖啡酰奎尼酸.方法可为川木香抗炎活性药效物质基础的发现及其"药效关联"的质量标准的建立提供一定的技术理论支持.
- 川木香 /
- 抗炎活性 /
- 高效液相色谱 /
- 谱效关联 /
- 药效物质基础
Abstract: The analysis of the spectrum-effect relationship of Vladimiriae Radix (VR) between the HPLC fingerprints and anti-inflammatory activities inorder to clarify the effective substances has been carried out. 12 samples of VR fingerprints were obtained by HPLC-DAD. The anti-inflammatory activity of VR was based on mouse auricle swelling test. The spectrum-effect relationship analysis were carried out by the partial lest-square regression method (PLS), using the data of 17 common peaks and efficacy data. By comparing with the reference substance and HPLC-MS/MS method, the great positive contribution peaks were identified. 17 common peaks were identified from the fingerprints of the samples and the aqueous extract of VR can inhibit the mouse auricle swelling caused by xylene. According to the PLS results, 10 peaks were P8 >P4 >P3 >P10 >P14 >P15 >P7 >P5 >P9 >P16 in the positive correlation with the anti-inflammatory activity, among them P3, P4, P8, P10 were identified as syringin, chlorogenic acid, caffeic acid and cynarin, respectively. Syringin, chlorogenic acid, caffeic acid and cynarin are parts of the effective substances of VR with anti-inflammatory activity. The method, can provide certain reference for the exploration of anti-inflammatory activity of efficacy base and the establishment of "efficacy related" quality standard for VR.
- VR /
- anti-inflammatory activity /
- HPLC /
- spectrum-activity relationship /
- effective substance

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图 1 川木香(S7)HPLC指纹图谱

Figure 1. HPLC fingerprints of VR(S7)

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图 2 混合对照品HPLC色谱图(P4:绿原酸，P8:咖啡酸)

Figure 2. HPLC chromatogram of mixed reference (P4:chlorogenic acid, P8:caffeic acid)

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图 3 紫丁香苷化学结构及负离子模式下碎片离子图

Figure 3. Chemical structure and negative mass spectrum of syringin

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图 4 1, 3-O-二咖啡酰奎尼酸化学结构及正离子模式下碎片离子图

Figure 4. Chemical structure and positive mass spectrum of cynarin

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图 5 绿原酸化学结构及负离子模式下质谱图

Figure 5. Chemical structure and negative mass spectrum of chlorogenic acid

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图 6 W1*r1/w2*r2散点图

Figure 6. W1*r1/w2*r2 scatter plot

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图 7 回归系数图

Figure 7. Coefficient plot

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表 1 川木香药材来源

Table 1. Source of VR

样品编号	名称^*	来源	购买日期
S1	Chmx-QHXN	青海西宁	2013-08-20
S2	Chmx-ChD-A-1	四川成都中药饮片A公司	2013-09-13
S3	Chmx-ChD-A-2	四川成都中药饮片A公司	2013-09-13
S4	Chmx-ChD-B	四川成都中药饮片B公司	2013-09-13
S5	Chmx-ChD-Hehc-1	四川成都荷花池药材市场	2013-09-13
S6	Chmx-ChD-Hehc-2	四川成都荷花池药材市场	2013-09-13
S7	Chmx-ChD-C-1	四川成都中药饮片C公司	2013-09-10
S8	Chmx-ChD-C-2	四川成都中药饮片C公司	2013-09-10
S9	Chmx-YNKM	云南昆明	2013-08-30
S10	Chmx-ChD-D-1	四川成都中药饮片D公司	2013-10-01
S11	Chmx-ChD-D-2	四川成都中药饮片D公司	2013-10-01
S12	Chmx-ChD-D-3	四川成都中药饮片D公司	2013-10-01
*:样本名称以其来源、批次为依据进行命名，如：“Chmx-ChD-A-1”为购于四川成都中药饮片A公司的第一批川木香.

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表 3 12批川木香药材抗炎试验结果

Table 3. Anti-inflammatory result of 12 batches of VR

组别	剂量/(g/kg)	耳廓肿胀/mg
甲硝唑	0.03	8.43±1.07
空白	9	11.39±1.43
S1	9	6.98±2.82^**
S2	9	9.23±1.64^*
S3	9	7.13±1.84^**
S4	9	8.36±1.29^**
S5	9	9.65±1.23^*
S6	9	9.95±0.81^*
S7	9	8.81±1.40^*
S8	9	6.52±0.85^**
S9	9	9.23±0.73^*
S10	9	9.76±0.87^*
S11	9	9.21±1.57^*
S12	9	9.55±1.55^*
：与空白组相比，P < 0.05. *：与空白组相比，P < 0.01.

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表 2 川木香共有峰峰面积

Table 2. HPLC common peak areas of VR (S1-S12)

样品组	共有峰峰面积
样品组	S1	S2	S3	S4	S5	S6	S7	S8	S9	S10	S11	S12
P1	203 697	120 426	76 695	139 130	125 226	376 437	498 990	58 821	115 178	522 091	578 043	561 690
P2	491 827	208 317	270 825	2 084 926	1 874 848	2 610 809	1 066 050	1 001 737	191 113	844 797	1 639 695	2 952 489
P3	108 032	76 508	155 381	139 816	67 679	113 201	70 834	180 177	67 415	83 209	75 223	82 258
P4	1 481 580	280 917	1 099 661	373 639	235 395	448 234	677 731	966 904	630 954	474 005	482 331	446 301
P5	404 256	233 985	816 893	1 152 732	682 380	778 983	298 539	822 526	571 083	10 467	10 527	42 928
P6	114 600	72 124	135 610	68 655	184 222	303 700	111 568	156 532	101 745	4 588	4 599	4 102
P7	120 561	94 493	83 080	92 482	339 383	112 633	124 578	129 986	100 432	232 225	234 504	235 719
P8	109 911	56 850	97 307	55 958	0	0	60 112	211 567	54 920	0	0	0
P9	99 075	35 847	108 497	102 675	38 254	51 085	37 077	60 794	34 885	194 676	192 259	190 406
P10	142 428	63 020	107 582	66 925	51 578	92 400	44 574	109 592	18 764	101 140	109 842	100 529
P11	86 803	54 864	169 828	204 659	172 487	337 830	58 278	64 723	32 116	85 642	83 747	96 105
P12	66 441	0	158 163	325 794	157 407	308 365	38 897	208 427	88 243	213 662	257 371	269 392
P13	40 044	299 396	41 420	137 685	214 881	159 651	56 359	48 136	241 526	136 339	133 907	139 329
P14	0	0	423 231	0	0	89 777	141 220	166 374	33 088	10 856	12 434	0
P15	0	0	86 359	615 456	93 379	0	150 516	518 376	342 756	2 356	13 259	0
P16	44 571	88 738	69 466	84 599	48 411	43 709	94 780	72 845	62 654	39 309	42 060	46 734
P17	33 177	25 572	119 825	216 175	234 382	226 938	15 311	15 885	13 923	149 069	148 543	147 322

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